Misaotra anao nitsidika ny nature.com. Voafetra ny fanohanan'ny CSS amin'ny dikan-tranonkala ampiasainao. Ho an'ny traikefa tsara indrindra, manoro hevitra anao izahay hampiasa ny dikan-tranonkala farany indrindra (na hamono ny fomba fifanarahana ao amin'ny Internet Explorer). Fanampin'izany, mba hahazoana antoka fa mitohy ny fanohanana, ity tranonkala ity dia tsy hampiditra styles na JavaScript.
Manana fiantraikany ara-batana sy ara-patholojika maro eo amin'ny vatan'olombelona ny hidrôzenina solifida (H2S). Ny sôdiôma hydrosulfida (NaHS) dia ampiasaina betsaka ho fitaovana ara-panafody handinihana ny vokatry ny H2S amin'ny andrana biolojika. Na dia maharitra minitra vitsy monja aza ny fahaverezan'ny H2S avy amin'ny vahaolana NaHS, dia efa nampiasaina ho singa mpanome ho an'ny H2S ao anaty rano fisotro ny vahaolana NaHS tamin'ny fanadihadiana biby sasany. Ity fanadihadiana ity dia nanadihady raha toa ka afaka mijanona ho marin-toerana mandritra ny 12–24 ora farafahakeliny ny rano fisotro misy fifantohana NaHS 30 μM voaomana ao anaty tavoahangy voalavo/totozy, araka ny soso-kevitry ny mpanoratra sasany. Manomàna vahaolana NaHS (30 μM) ao anaty rano fisotro ary araraka avy hatrany ao anaty tavoahangy rano ho an'ny voalavo/totozy. Nangonina avy amin'ny tendrony sy ny ao anatin'ny tavoahangy rano ny santionany tamin'ny 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 ary 24 ora mba handrefesana ny votoatin'ny solifida amin'ny fampiasana ny fomba methylene blue. Ankoatra izany, notsindronina NaHS (30 μM) nandritra ny roa herinandro ny voalavo lahy sy vavy ary norefesina isaky ny roa andro ny fifantohana sulfide serum nandritra ny herinandro voalohany sy tamin'ny faran'ny herinandro faharoa. Tsy marin-toerana ny vahaolana NaHS tao amin'ny santionany azo avy amin'ny tendron'ny tavoahangin-drano; nihena 72% sy 75% izany rehefa afaka 12 sy 24 ora. Tamin'ireo santionany azo avy amin'ny ao anatin'ny tavoahangin-drano, tsy dia nisy fiantraikany firy ny fihenan'ny NaHS tao anatin'ny 2 ora; na izany aza, nihena 47% sy 72% izany rehefa afaka 12 sy 24 ora. Tsy nisy fiantraikany tamin'ny haavon'ny sulfide serum an'ny voalavo lahy sy vavy ny tsindrona NaHS. Ho fehin-kevitra, ny vahaolana NaHS namboarina avy amin'ny rano fisotro dia tsy tokony hampiasaina amin'ny fanomezana H2S satria tsy marin-toerana ny vahaolana. Ity fomba fampidirana ity dia hampiharihary ny biby amin'ny habetsahan'ny NaHS tsy ara-dalàna sy kely kokoa noho ny nantenaina.
Ny hidrôzenina solifida (H2S) dia efa nampiasaina ho poizina nanomboka tamin'ny taona 1700; na izany aza, ny mety ho anjara asany amin'ny maha-molekiola famantarana biolojika azy dia nohazavain'i Abe sy Kimura tamin'ny taona 1996. Nandritra ny telopolo taona lasa, dia maro ny asan'ny H2S amin'ny rafitra olombelona isan-karazany no nohazavaina, izay nitarika ho amin'ny fahatsapana fa ny molekiola mpanome H2S dia mety manana fampiharana ara-pitsaboana amin'ny fitsaboana na fitantanana aretina sasany; jereo ny Chirino et al. raha mila famerenana vao haingana.
Ny sodium hydrosulfide (NaHS) dia efa nampiasaina betsaka ho fitaovana ara-panafody hanombanana ny vokatry ny H2S amin'ny kolontsaina sela sy ny fandalinana biby maro5,6,7,8. Na izany aza, ny NaHS dia tsy mpanome H2S tonga lafatra satria miova haingana ho H2S/HS- ao anaty vahaolana, mora voaloto amin'ny polysulfides, ary mora oxidized sy miempo4,9. Amin'ny andrana biolojika maro, ny NaHS dia levona ao anaty rano, ka miteraka fiempo tsy mihetsika sy fahaverezan'ny H2S10,11,12, oxidation ho azy ny H2S11,12,13, ary photolysis14. Ny sulfide ao amin'ny vahaolana tany am-boalohany dia very haingana dia haingana noho ny fiempoan'ny H2S11. Ao anaty fitoeran-javatra misokatra, ny antsasaky ny androm-piainan'ny H2S (t1/2) dia eo amin'ny 5 minitra eo ho eo, ary mihena eo amin'ny 13% isan-minitra ny fifantohany10. Na dia minitra vitsy monja aza ny fahaverezan'ny solifara hidrôzenina avy amin'ny vahaolana NaHS, dia nisy fanadihadiana natao tamin'ny biby nampiasa vahaolana NaHS ho loharanon'ny solifara hidrôzenina ao anaty rano fisotro mandritra ny 1–21 herinandro, ka nanolo ny vahaolana misy NaHS isaky ny 12–24 ora.15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 Tsy mifanaraka amin'ny fitsipiky ny fikarohana siantifika ity fomba fanao ity, satria ny fatran'ny fanafody dia tokony hiorina amin'ny fampiasana azy amin'ny karazam-biby hafa, indrindra fa ny olombelona.27
Ny fikarohana mialoha ny fitsaboana amin'ny biomedicine dia mikendry ny hanatsara ny kalitaon'ny fikarakarana marary na ny vokatra azo avy amin'ny fitsaboana. Na izany aza, ny ankamaroan'ny fanadihadiana natao tamin'ny biby dia mbola tsy nadika tamin'ny olombelona28,29,30. Ny iray amin'ireo antony mahatonga ity tsy fahombiazan'ny fandikan-teny ity dia ny tsy fahampian'ny fiheverana ny kalitaon'ny metodolojika amin'ny fanadihadiana natao tamin'ny biby30. Noho izany, ny tanjon'ity fanadihadiana ity dia ny handinika raha toa ka afaka mijanona ho marin-toerana ao anaty rano fisotro mandritra ny 12–24 ora ny vahaolana NaHS 30 μM voaomana ao anaty tavoahangin-drano ho an'ny voalavo/totozy, araka ny voalaza na soso-kevitra tamin'ny fanadihadiana sasany.
Ny andrana rehetra natao tamin'ity fandalinana ity dia natao mifanaraka amin'ny torolàlana navoaka momba ny fikarakarana sy ny fampiasana biby laboratoara ao Iran31. Ny tatitra andrana rehetra natao tamin'ity fandalinana ity dia nanaraka ny torolàlana ARRIVE32 ihany koa. Ny Komitin'ny Etika ao amin'ny Institute of Endocrine Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, dia nankatoa ny fomba andrana rehetra natao tamin'ity fandalinana ity.
Novidiana tao amin'ny Biochem, Chemopahrama (Cosne-sur-Loire, Frantsa ny zinc acetate dihydrate (CAS: 5970-45-6) sy ny ferric chloride tsy misy rano (CAS: 7705-08-0). Novidiana tao amin'ny Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Etazonia) ny sodium hydrosulfide hydrate (CAS: 207683-19-0) sy ny N,N-dimethyl-p-phenylenediamine (DMPD) (CAS: 535-47-0). Novidiana tao amin'ny Piramal (Bethlehem, PA, Etazonia) ny isoflurane. Novidiana tao amin'ny Merck (Darmstadt, Alemaina) ny hydrochloric acid (HCl).
Manomàna vahaolana NaHS (30 μM) ao anaty rano fisotro ary araraka avy hatrany ao anaty tavoahangin-drano ho an'ny voalavo/totozy. Ity fifantohana ity dia nofidiana mifototra amin'ny boky maro mampiasa NaHS ho loharanon'ny H2S; jereo ny fizarana Fifanakalozan-kevitra. Ny NaHS dia molekiola hydrated izay mety misy rano hydrated isan-karazany (ohatra, NaHS•xH2O); araka ny mpanamboatra, ny isan-jaton'ny NaHS nampiasaina tamin'ny fanadihadianay dia 70.7% (ohatra, NaHS•1.3 H2O), ary nodinihinay io sanda io tamin'ny kajikajinay, izay nampiasanay lanja molekiola 56.06 g/mol, izay lanjan'ny molekiola NaHS tsy misy rano. Ny rano hydrated (antsoina koa hoe rano kristaly) dia ny molekiola rano izay mamorona ny rafitra kristaly33. Ny hydrates dia manana toetra ara-batana sy thermodynamic samihafa raha oharina amin'ny anhydrates34.
Alohan'ny hanampiana ny NaHS amin'ny rano fisotro dia refeso ny pH sy ny mari-pana amin'ny solvent. Araraka avy hatrany ao anaty tavoahangin-drano ho an'ny voalavo/totozy ao anaty tranom-biby ny vahaolana NaHS. Nangonina avy amin'ny tendrony sy avy ao anatin'ny tavoahangin-drano ny santionany tamin'ny 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12, ary 24 ora mba handrefesana ny votoatin'ny solifara. Natao avy hatrany ny fandrefesana ny solifara taorian'ny fakana santionany tsirairay. Nahazo santionany avy amin'ny tendron'ny fantsona izahay satria nisy fanadihadiana sasany naneho fa ny haben'ny mason-drano kely dia afaka mampihena ny etona H2S15,19. Toa mihatra amin'ny vahaolana ao anaty tavoahangy ihany koa ity olana ity. Na izany aza, tsy izany no nitranga tamin'ny vahaolana tao amin'ny vozon'ny tavoahangin-drano, izay nanana tahan'ny etona ambony kokoa ary autooxidizing; raha ny marina, ny biby no nisotro io rano io aloha.
Voalavo Wistar lahy sy vavy no nampiasaina tamin'ny fanadihadiana. Napetraka tao anaty tranom-borona polypropylene (voalavo 2–3 isaky ny tranom-borona) ireo voalavo teo ambanin'ny fepetra mahazatra (hafanana 21–26 °C, hamandoana 32–40%) miaraka amin'ny hazavana 12 ora (7 maraina hatramin'ny 7 hariva) ary haizina 12 ora (7 hariva hatramin'ny 7 maraina). Afaka nisotro rano madio ireo voalavo ary nomena sakafo mahazatra (Khorak Dam Pars Company, Tehran, Iran). Nozaraina kisendrasendra ho vondrona fanaraha-maso sy vondrona NaHS (30 μM) ireo voalavo Wistar vavy (n=10, lanjan'ny vatana: 190–230 g) sy lahy (n=10, lanjan'ny vatana: 320–370 g) (n=5 isaky ny vondrona) (mba hamaritana ny haben'ny santionany). Mba hamaritana ny haben'ny santionany, dia nampiasa ny fomba fiasa KISS (Keep It Simple, Stupid) izahay, izay mampifangaro ny traikefa teo aloha sy ny famakafakana ny hery35. Nanao fanadihadiana andrana tamin'ny voalavo 3 aloha izahay ary namaritra ny salan'isa haavon'ny sulfide totalin'ny serum sy ny fivilian-dàlana mahazatra (8.1 ± 0.81 μM). Avy eo, raha jerena ny hery 80% ary heverina fa misy ambaratonga manan-danja 5% amin'ny lafiny roa, dia namaritra ny haben'ny santionany voalohany (n = 5 mifototra amin'ny literatiora teo aloha) izay mifanaraka amin'ny haben'ny vokatra manara-penitra 2.02 miaraka amin'ny sanda voafaritra mialoha natolotry ny Festing ho an'ny fikajiana ny haben'ny santionany amin'ny biby fanandramana35. Rehefa avy nampitomboina tamin'ny SD (2.02 × 0.81) io sanda io, dia 20% ny haben'ny vokatra azo vinavinaina (1.6 μM), izay azo ekena. Midika izany fa ny n = 5/vondrona dia ampy hamantarana ny fiovana salan'isa 20% eo amin'ny vondrona. Nozaraina kisendrasendra ho vondrona fanaraha-maso sy vondrona notsaboina NaSH ny voalavo tamin'ny fampiasana ny fiasa kisendrasendra amin'ny rindrambaiko Excel 36 (Sary Fanampiny 1). Natao tamin'ny ambaratonga vokatra ny Blinding, ary ireo mpikaroka nanao ny fandrefesana biochemika dia tsy nahalala ny fanendrena vondrona.
Notsaboina tamin'ny vahaolana NaHS 30 μM izay nomanina tao anaty rano fisotro nandritra ny 2 herinandro ny vondrona NaHS avy amin'ny lahy sy ny vavy; Nomena vahaolana vaovao isaky ny 24 ora, ary nandritra izany fotoana izany no nandrefesana ny lanjan'ny vatana. Nangonina avy amin'ny tendron'ny rambon'ny voalavo rehetra ny santionan-dra teo ambanin'ny fanatoranana isoflurane isaky ny roa andro tamin'ny faran'ny herinandro voalohany sy faharoa. Notsindrina tamin'ny 3000 g nandritra ny 10 minitra ny santionan-dra, nosarahina ny serum ary notehirizina tamin'ny -80°C mba handrefesana ny urea serum, creatinine (Cr), ary ny sulfide manontolo. Ny urea serum dia voafaritra tamin'ny alàlan'ny fomba urease enzymatic, ary ny creatinine serum dia voafaritra tamin'ny alàlan'ny fomba Jaffe photometric mampiasa kitapo azo vidiana eny an-tsena (Man Company, Tehran, Iran) sy mpanadihady mandeha ho azy (Selectra E, laharana serial 0-2124, Holandy). Ny coefficients of variation intra- sy interassay ho an'ny urea sy Cr dia latsaky ny 2.5%.
Ny fomba methylene blue (MB) dia ampiasaina handrefesana ny totalin'ny sulfide ao anaty rano fisotro sy serum misy NaHS; MB no fomba ampiasaina matetika indrindra handrefesana ny sulfide ao anaty vahaolana betsaka sy santionany biolojika11,37. Azo ampiasaina hanombanana ny totalin'ny dobo sulfide38 ny fomba MB ary handrefesana ny totalin'ny sulfide tsy organika amin'ny endrika H2S, HS- ary S2 ao anaty dingana rano39. Amin'ity fomba ity, ny solifara dia mivaingana ho zinc sulfide (ZnS) eo anatrehan'ny zinc acetate11,38. Ny rotsak'orana zinc acetate no fomba ampiasaina betsaka indrindra hanasarahana ny sulfide amin'ny chromophores hafa11. Ny ZnS dia naverina levona tamin'ny fampiasana HCl11 teo ambanin'ny toe-javatra asidra mahery. Ny sulfide dia mihetsika amin'ny DMPD amin'ny tahan'ny stoichiometrika 1:2 amin'ny fihetsika iray izay ampiasain'ny ferric chloride (Fe3+ miasa ho toy ny oxidizing agent) mba hamorona ny loko MB, izay hita amin'ny spectrophotometric amin'ny 670 nm40,41. Ny fetran'ny fahitana amin'ny fomba MB dia eo amin'ny 1 μM11 eo ho eo.
Ato amin'ity fandalinana ity, dia nampiana tao anaty fantsona ny 100 μL amin'ny santionany tsirairay (vahaolana na sérum); avy eo dia nampiana 200 μL amin'ny zinc acetate (1% w/v amin'ny rano voadio), 100 μL amin'ny DMPD (20 mM amin'ny 7.2 M HCl), ary 133 μL amin'ny FeCl3 (30 mM amin'ny 1.2 M HCl). Notehirizina tao anaty haizina nandritra ny 30 minitra tamin'ny 37°C ny fangaro. Notsindrina tamin'ny 10.000 g nandritra ny 10 minitra ny vahaolana, ary novakiana tamin'ny 670 nm ny fidiran'ny supernatant tamin'ny fampiasana mpamaky microplate (BioTek, MQX2000R2, Winooski, VT, Etazonia). Ny fifantohana sulfide dia voafaritra tamin'ny fampiasana fiolahana calibration an'ny NaHS (0–100 μM) amin'ny ddH2O (Sary Fanampiny 2). Ny vahaolana rehetra nampiasaina tamin'ny fandrefesana dia vao nomanina. Ny coefficient of variation intra- sy interassay ho an'ny fandrefesana sulfide dia 2.8% sy 3.4% tsirairay avy. Nofaritanay ihany koa ny totalin'ny sulfide azo avy amin'ny santionan'ny rano fisotro sy serum misy sodium thiosulfate amin'ny alàlan'ny fomba santionany nohamafisina42. Ny famerenana ho an'ny santionan'ny rano fisotro sy serum misy sodium thiosulfate dia 91 ± 1.1% (n = 6) sy 93 ± 2.4% (n = 6).
Natao tamin'ny alalan'ny rindrambaiko GraphPad Prism version 8.0.2 ho an'ny Windows (GraphPad Software, San Diego, CA, Etazonia, www.graphpad.com) ny fanadihadiana statistika. Nampiasaina ny fitsapana-t miaraka mba hampitahana ny mari-pana sy ny pH-n'ny rano fisotro taloha sy taorian'ny fanampiana NaHS. Ny fahaverezan'ny H2S tao amin'ny vahaolana misy NaHS dia nokajiana ho isan-jaton'ny fihenana avy amin'ny fidiran'ny NaHS voalohany, ary mba hanombanana raha toa ka manan-danja ara-statistika ny fatiantoka, dia nanao ANOVA fandrefesana miverimberina amin'ny fomba iray izahay narahin'ny fitsapana fampitahana marobe an'i Dunnett. Ny lanjan'ny vatana, ny urea serum, ny creatinine serum, ary ny solifida serum manontolo rehefa mandeha ny fotoana dia nampitahaina teo amin'ny voalavo fanaraha-maso sy ny voalavo notsaboina NaHS avy amin'ny lahy sy ny vavy samihafa tamin'ny alalan'ny ANOVA mifangaro roa (eo anelanelan'ny) narahin'ny fitsapana Bonferroni post hoc. Ny sandan'ny P roa < 0.05 dia noheverina ho manan-danja ara-statistika.
7.60 ± 0.01 ny pH-n'ny rano fisotro talohan'ny nanampiana NaHS ary 7.71 ± 0.03 taorian'ny nanampiana NaHS (n = 13, p = 0.0029). 26.5 ± 0.2 ny mari-pana ary nihena ho 26.2 ± 0.2 taorian'ny nanampiana NaHS (n = 13, p = 0.0128). Omano ao anaty rano fisotro ny vahaolana NaHS 30 μM ary tehirizo ao anaty tavoahangin-drano. Tsy marin-toerana ny vahaolana NaHS ary mihena ny fifantohany rehefa mandeha ny fotoana. Rehefa naka santionany avy tao amin'ny vozon'ny tavoahangin-drano, dia nisy fihenana be (68.0%) hita tao anatin'ny adiny voalohany, ary nihena 72% sy 75% ny votoatin'ny NaHS tao amin'ny vahaolana rehefa afaka 12 sy 24 ora. Tamin'ny santionany azo avy amin'ny tavoahangin-drano, dia tsy dia nisy fihenana be loatra ny NaHS hatramin'ny 2 ora, fa rehefa afaka 12 sy 24 ora dia nihena 47% sy 72% izany. Ireo angon-drakitra ireo dia manondro fa ny isan-jaton'ny NaHS ao anaty vahaolana 30 μM voaomana amin'ny rano fisotro dia nihena ho eo amin'ny ampahefatry ny sandany voalohany rehefa afaka 24 ora, na aiza na aiza toerana fakana santionany (Sary 1).
Faharetan'ny vahaolana NaHS (30 μM) ao anaty rano fisotro ao anaty tavoahangin-drano ho an'ny voalavo/totozy. Rehefa avy nomanina ny vahaolana dia nalaina ny santionany avy amin'ny tendrony sy ny ao anatin'ny tavoahangin-drano. Aseho amin'ny salan'isa ± SD (n = 6/vondrona) ny angon-drakitra. * sy #, P < 0.05 raha oharina amin'ny fotoana 0. Ny sarin'ny tavoahangin-drano dia mampiseho ny tendrony (miaraka amin'ny fisokafana) sy ny vatan'ny tavoahangy. Manodidina ny 740 μL ny haben'ny tendrony.
Ny fifantohan'ny NaHS tao amin'ny vahaolana 30 μM vao avy nomanina dia 30.3 ± 0.4 μM (eo anelanelany: 28.7–31.9 μM, n = 12). Na izany aza, rehefa afaka 24 ora, dia nihena ho ambany kokoa ny fifantohan'ny NaHS (salan'isa: 3.0 ± 0.6 μM). Araka ny aseho amin'ny Sary 2, ny fifantohan'ny NaHS izay niharan'ny voalavo dia tsy nitovy nandritra ny vanim-potoanan'ny fandalinana.
Nitombo be ny lanjan'ny voalavo vavy rehefa nandeha ny fotoana (avy amin'ny 205.2 ± 5.2 g ka hatramin'ny 213.8 ± 7.0 g tao amin'ny vondrona fanaraha-maso ary avy amin'ny 204.0 ± 8.6 g ka hatramin'ny 211.8 ± 7.5 g tao amin'ny vondrona notsaboina NaHS); na izany aza, tsy nisy fiantraikany tamin'ny lanjan'ny vatana ny fitsaboana NaHS (Sary 3). Nitombo be ny lanjan'ny voalavo lahy rehefa nandeha ny fotoana (avy amin'ny 338.6 ± 8.3 g ka hatramin'ny 352.4 ± 6.0 g tao amin'ny vondrona fanaraha-maso ary avy amin'ny 352.4 ± 5.9 g ka hatramin'ny 363.2 ± 4.3 g tao amin'ny vondrona notsaboina NaHS); na izany aza, tsy nisy fiantraikany tamin'ny lanjan'ny vatana ny fitsaboana NaHS (Sary 3).
Fiovana eo amin'ny lanjan'ny vatana amin'ny voalavo vavy sy lahy aorian'ny fampiasana NaHS (30 μM). Aseho amin'ny salan'isa ± SEM ny angon-drakitra ary nampitahaina tamin'ny fampiasana fanadihadiana roa sosona mifangaro (eo anelanelany) miaraka amin'ny fitsapana Bonferroni post hoc. n = 5 isaky ny lahy sy vavy ao amin'ny vondrona tsirairay.
Mitovy ny fifantohan'ny urea sy ny creatine phosphate ao amin'ny ra amin'ny voalavo fanaraha-maso sy ny voalavo notsaboina tamin'ny NaSH nandritra ny fanadihadiana. Ankoatra izany, ny fitsaboana NaSH dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny fifantohan'ny urea sy ny creatinechrome ao amin'ny ra (Tabilao 1).
Mitovy ny fifantohana sulfida manontolo ao amin'ny serum fototra teo amin'ny voalavo lahy (8.1 ± 0.5 μM vs. 9.3 ± 0.2 μM) sy vavy (9.1 ± 1.0 μM vs. 6.1 ± 1.1 μM) izay notsaboina tamin'ny NaHS. Tsy nisy fiantraikany tamin'ny haavon'ny sulfida manontolo ao amin'ny serum ny fampidirana NaHS nandritra ny 14 andro na tamin'ny voalavo lahy na vavy (Sary 4).
Fiovana eo amin'ny fifantohan'ny solifida manontolo ao amin'ny serum amin'ny voalavo lahy sy vavy aorian'ny fampiasana NaHS (30 μM). Aseho amin'ny salan'isa ± SEM ny angon-drakitra ary nampitahaina tamin'ny fampiasana fanadihadiana roa sosona (ao anatin'ny) momba ny fiovaovana miaraka amin'ny fitsapana Bonferroni post hoc. Isaky ny lahy sy ny vavy, n = 5/vondrona.
Ny fehin-kevitra lehibe amin'ity fanadihadiana ity dia ny tsy fahamarinan-toerana ny rano fisotro misy NaHS: eo amin'ny ampahefatry ny totalin'ny solifara voalohany ihany no azo tsikaritra 24 ora aorian'ny fakana santionany avy amin'ny tendrony sy ao anatin'ny tavoahangin-dranon'ny voalavo/totozy. Ankoatra izany, niharan'ny fifantohana NaHS tsy azo antoka ny voalavo noho ny fahaverezan'ny H2S tao amin'ny vahaolana NaHS, ary ny fanampiana NaHS tao anaty rano fisotro dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny lanjan'ny vatana, ny urea sy ny creatine chromium ao amin'ny serum, na ny totalin'ny solifara serum.
Ato amin'ity fandalinana ity, ny tahan'ny fahaverezan'ny H2S avy amin'ny vahaolana NaHS 30 μM voaomana amin'ny rano fisotro dia eo amin'ny 3% isan'ora eo ho eo. Ao amin'ny vahaolana buffered (100 μM sodium sulfide ao anaty 10 mM PBS, pH 7.4), dia voalaza fa nihena 7% ny fifantohana sulfide rehefa mandeha ny fotoana mandritra ny 8 ora11. Efa niaro ny fampidirana NaHS intraperitoneal izahay tamin'ny fitaterana fa ny tahan'ny fahaverezan'ny sulfide avy amin'ny vahaolana NaHS 54 μM ao anaty rano fisotro dia eo amin'ny 2.3% isan'ora eo ho eo (4%/ora amin'ny 12 ora voalohany ary 1.4%/ora amin'ny 12 ora farany aorian'ny fanomanana)8. Ny fandalinana teo aloha43 dia nahita fahaverezan'ny H2S tsy tapaka avy amin'ny vahaolana NaHS, indrindra noho ny volatilization sy ny oxidation. Na dia tsy misy fanampiana bubbles aza, dia very haingana ny sulfide ao amin'ny vahaolana tahiry noho ny volatilization H2S11. Nasehon'ny fanadihadiana fa mandritra ny dingan'ny fanalefahana, izay maharitra 30–60 segondra eo ho eo, dia eo amin'ny 5–10% eo ho eo amin'ny H2S no very noho ny etona6. Mba hisorohana ny etona avy amin'ny vahaolana, dia nandray fepetra maromaro ireo mpikaroka, anisan'izany ny fikororohana moramora ny vahaolana12, ny fandrakofana ny vahaolana amin'ny plastika6, ary ny fampihenana ny fiparitahan'ny vahaolana amin'ny rivotra, satria ny tahan'ny etona avy amin'ny H2S dia miankina amin'ny fifandraisan'ny rivotra sy ny rano.13 Ny oksidasiona ho azy ny H2S dia mitranga indrindra noho ny ion-metaly tetezamita, indrindra fa ny vy ferrika, izay loto ao anaty rano.13 Ny oksidasiona ny H2S dia miteraka fiforonan'ny polysulfides (atôma solifara mifamatotra amin'ny alalan'ny fatorana covalent)11. Mba hisorohana ny oksidasionany, dia omanina ao anaty solvent tsy misy oksizenina ny vahaolana misy H2S44,45 ary avy eo dia diovina amin'ny argon na azota mandritra ny 20–30 minitra mba hahazoana antoka ny tsy fisian'ny oksizenina.11,12,37,44,45,46 Ny asidra Diethylenetriaminepentaacetic (DTPA) dia chelator metaly (10–4 M) izay misoroka ny oksidasiona HS- ao anaty vahaolana aerobika. Raha tsy misy DTPA, ny tahan'ny oksidasiona HS- dia eo amin'ny 50% eo ho eo mandritra ny 3 ora eo ho eo amin'ny 25°C37,47. Ankoatra izany, satria ny oksidasiona 1e-sulfide dia fehezin'ny hazavana ultraviolet, dia tokony hotehirizina ao anaty ranomandry ny vahaolana ary arovana amin'ny hazavana11.
Araka ny aseho amin'ny Sary 5, ny NaHS dia misaraka ho Na+ sy HS-6 rehefa levona anaty rano; io fisarahana io dia voafaritry ny pK1 amin'ny fihetsiketsehana, izay miankina amin'ny mari-pana: pK1 = 3.122 + 1132/T, izay eo anelanelan'ny 5 ka hatramin'ny 30°C ny T ary refesina amin'ny degre Kelvin (K), K = °C + 273.1548. Ny HS- dia manana pK2 avo (pK2 = 19), ka amin'ny pH < 96.49, ny S2- dia tsy miforona na miforona amin'ny fatra kely dia kely. Mifanohitra amin'izany, ny HS- dia miasa toy ny fototra ary mandray H+ avy amin'ny molekiola H2O, ary ny H2O dia miasa toy ny asidra ary miova ho H2S sy OH-.
Fiforonan'ny entona H2S levona ao anaty vahaolana NaHS (30 µM). aq, vahaolana anaty rano; g, entona; l, ranoka. Ny kajikajy rehetra dia mihevitra fa ny pH-n'ny rano = 7.0 ary ny mari-pana-rano = 20 °C. Noforonina tamin'ny BioRender.com.
Na dia eo aza ny porofo fa tsy marin-toerana ny vahaolana NaHS, dia nisy fanadihadiana maromaro natao tamin'ny biby nampiasa vahaolana NaHS tao anaty rano fisotro ho toy ny singa mpanome H2S15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 miaraka amin'ny faharetan'ny fitsaboana manomboka amin'ny 1 ka hatramin'ny 21 herinandro (Tabilao 2). Nandritra ireo fanadihadiana ireo, dia nohavaozina isaky ny 12 ora, 15, 17, 18, 24, 25 ora na 24 ora, 19, 20, 21, 22, 23 ora ny vahaolana NaHS. Ny valin'ny fikarohanay dia naneho fa niharan'ny fifantohana tsy marin-toerana ny voalavo noho ny fahaverezan'ny H2S avy amin'ny vahaolana NaHS, ary niovaova be ny votoatin'ny NaHS tao anaty rano fisotron'ny voalavo nandritra ny 12 na 24 ora (jereo ny Sary 2). Roa tamin'ireo fanadihadiana ireo no nitatitra fa nijanona ho marin-toerana ny haavon'ny H2S tao anaty rano nandritra ny 24 ora 22 na 2–3% monja ny fatiantoka H2S hita nandritra ny 12 ora 15, saingy tsy nanome angon-drakitra na antsipiriany momba ny fandrefesana izy ireo. Fikarohana roa no naneho fa ny savaivony kely amin'ny tavoahangin-drano dia afaka mampihena ny etona H2S15,19. Na izany aza, ny valin'ny fikarohanay dia naneho fa mety hampihemotra ny fahaverezan'ny H2S avy amin'ny tavoahangin-drano mandritra ny 2 ora fotsiny izany fa tsy 12–24 ora. Samy manamarika ireo fanadihadiana roa ireo fa mihevitra izahay fa tsy niova ny haavon'ny NaHS tao anaty rano fisotro satria tsy nahita fiovan'ny loko tao anaty rano izahay; noho izany, tsy dia nisy dikany ny oksidasionan'ny H2S amin'ny rivotra19,20. Mahagaga fa ity fomba subjective ity dia manombana ny fahamarinan'ny NaHS ao anaty rano fa tsy mandrefy ny fiovan'ny fifantohany rehefa mandeha ny fotoana.
Ny fahaverezan'ny H2S ao amin'ny vahaolana NaHS dia mifandray amin'ny pH sy ny mari-pana. Araka ny voalaza tao amin'ny fanadihadianay, ny faharavan'ny NaHS ao anaty rano dia miteraka vahaolana alkaline50. Rehefa levona ao anaty rano ny NaHS, ny fiforonan'ny entona H2S levona dia miankina amin'ny sandan'ny pH6. Arakaraka ny maha-ambany ny pH-n'ny vahaolana no maha-betsaka ny ampahany amin'ny NaHS ho toy ny molekiolan'ny entona H2S ary arakaraka ny maha-betsaka ny sulfide very amin'ny vahaolana rano11. Tsy nisy tamin'ireo fanadihadiana ireo nitatitra ny pH-n'ny rano fisotro ampiasaina ho solvent ho an'ny NaHS. Araka ny tolo-kevitry ny OMS, izay raisin'ny ankamaroan'ny firenena, ny pH-n'ny rano fisotro dia tokony ho eo amin'ny elanelana 6.5–8.551. Amin'io elanelana pH io, ny tahan'ny oksidasiona ho azy ny H2S dia mitombo eo amin'ny folo heny eo ho eo13. Ny faharavan'ny NaHS ao anaty rano amin'io elanelana pH io dia hiteraka fifantohana entona H2S levona eo anelanelan'ny 1 sy 22.5 μM, izay manamafy ny maha-zava-dehibe ny fanaraha-maso ny pH-n'ny rano alohan'ny haharavan'ny NaHS. Ankoatra izany, ny mari-pana voalaza tao amin'ny fanadihadiana etsy ambony (18–26 °C) dia hiteraka fiovana eo amin'ny fifantohan'ny entona H2S levona ao anaty vahaolana eo amin'ny 10% eo ho eo, satria manova ny pK1 ny fiovan'ny mari-pana, ary ny fiovana kely eo amin'ny pK1 dia mety hisy fiantraikany lehibe amin'ny fifantohan'ny entona H2S levona48. Ankoatra izany, ny faharetan'ny fanadihadiana sasany (5 volana)22, izay antenaina fa hisy fiovaovan'ny mari-pana lehibe, dia mampitombo ihany koa ity olana ity.
Ny fanadihadiana rehetra afa-tsy ny iray21 dia nampiasa vahaolana NaHS 30 μM tao anaty rano fisotro. Mba hanazavana ny fatra nampiasaina (ohatra 30 μM), ny mpanoratra sasany dia nanipika fa ny NaHS ao anaty dingana rano dia mamokatra fifantohana mitovy amin'ny entona H2S ary ny elanelana ara-batana an'ny H2S dia 10 ka hatramin'ny 100 μM, ka io fatra io dia ao anatin'ny elanelana ara-batana15,16. Ny hafa kosa nanazava fa ny NaHS 30 μM dia afaka mitazona ny haavon'ny H2S ao anaty plasma ao anatin'ny elanelana ara-batana, izany hoe 5–300 μM19,20. Heverintsika ny fifantohana NaHS ao anaty rano 30 μM (pH = 7.0, T = 20 °C), izay nampiasaina tamin'ny fanadihadiana sasany handinihana ny vokatry ny H2S. Afaka manisa isika fa ny fifantohana ny entona H2S levona dia 14.7 μM, izay eo amin'ny 50% eo ho eo amin'ny fifantohana NaHS voalohany. Mitovy amin'ny sanda nokajian'ny mpanoratra hafa tamin'ny toe-javatra mitovy io sanda io13,48.
Tao amin'ny fianarantsika, ny fampidirana NaHS dia tsy nanova ny lanjan'ny vatana; ity vokatra ity dia mifanaraka amin'ny vokatry ny fanadihadiana hafa natao tamin'ny totozy lahy22,23 sy ny voalavo lahy18; Na izany aza, fanadihadiana roa no nitatitra fa ny NaSH dia namerina ny fihenan'ny lanjan'ny vatana tamin'ny voalavo nopotehina24,26, raha toa kosa ny fanadihadiana hafa dia tsy nitatitra ny fiantraikan'ny fampidirana NaSH tamin'ny lanjan'ny vatana15,16,17,19,20,21,25. Ankoatra izany, tao amin'ny fianarantsika, ny fampidirana NaSH dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny haavon'ny urea sy creatine chromium serum, izay mifanaraka amin'ny vokatry ny tatitra hafa25.
Hitan'ny fanadihadiana fa ny fanampiana NaHS amin'ny rano fisotro mandritra ny 2 herinandro dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny fifantohana sulfide serum manontolo amin'ny voalavo lahy sy vavy. Mifanaraka amin'ny valin'ny Sen et al. (16) ity zavatra hita ity: ny fitsaboana 30 μM NaHS amin'ny rano fisotro mandritra ny 8 herinandro dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny haavon'ny sulfide plasma amin'ny voalavo fanaraha-maso; na izany aza, nitatitra izy ireo fa ity fitsaboana ity dia namerina ny fihenan'ny haavon'ny H2S ao amin'ny plasma amin'ny totozy voatsabo. Li et al. (22) koa dia nitatitra fa ny fitsaboana 30 μM NaHS amin'ny rano fisotro mandritra ny 5 volana dia nampitombo ny haavon'ny sulfide maimaim-poana plasma amin'ny totozy efa antitra eo amin'ny 26%. Ny fanadihadiana hafa dia tsy nitatitra fiovana eo amin'ny sulfide mikoriana aorian'ny fanampiana NaHS amin'ny rano fisotro.
Fito ny fanadihadiana nitatitra fa nampiasa Sigma NaHS15,16,19,20,21,22,23 saingy tsy nanome antsipiriany fanampiny momba ny rano hydration, ary dimy ny fanadihadiana tsy nanonona ny loharanon'ny NaHS nampiasaina tamin'ny fomba fanomanana azy ireo17,18,24,25,26. Molekiola hydrated ny NaHS ary mety miovaova ny votoatin'ny rano hydration ao aminy, izay misy fiantraikany amin'ny habetsaky ny NaHS ilaina hanomanana vahaolana amin'ny molarity iray. Ohatra, ny votoatin'ny NaHS tao amin'ny fanadihadianay dia NaHS•1.3 H2O. Noho izany, ny fifantohana NaHS tena izy amin'ireo fanadihadiana ireo dia mety ho ambany noho ireo voalaza.
"Ahoana no ahafahan'ny akora fohy toy izany manana fiantraikany maharitra toy izany?" Nametraka io fanontaniana io i Pozgay et al.21 rehefa nanombana ny fiantraikan'ny NaHS amin'ny kolitika amin'ny totozy. Manantena izy ireo fa ny fanadihadiana amin'ny ho avy dia ho afaka hamaly io fanontaniana io ary hieritreritra fa ny vahaolana NaHS dia mety ahitana polysulfides marin-toerana kokoa ankoatra ny H2S sy ny disulfides izay mpanelanelana ny fiantraikan'ny NaHS21. Ny mety ho iray hafa dia ny hoe ny fifantohana NaHS ambany dia ambany sisa tavela ao amin'ny vahaolana dia mety hisy fiantraikany tsara ihany koa. Raha ny marina, Olson et al. dia nanome porofo fa ny haavon'ny H2S micromolar ao amin'ny ra dia tsy ara-batana ary tokony ho ao anatin'ny elanelana nanomolar na tsy misy mihitsy13. Ny H2S dia mety hiasa amin'ny alàlan'ny sulfation proteinina, fanovana azo averina aorian'ny fandikana izay misy fiantraikany amin'ny fiasa, ny fahamarinan-toerana ary ny toerana misy ny proteinina maro52,53,54. Raha ny marina, amin'ny toe-javatra ara-batana, eo amin'ny 10% ka hatramin'ny 25% eo ho eo amin'ny proteinina aty maro no sulfylated53. Samy miaiky ny fahasimbana haingana amin'ny NaHS19,23 ireo fanadihadiana roa ireo saingy mahagaga fa milaza fa "voafehinay ny fifantohan'ny NaHS ao anaty rano fisotro amin'ny alàlan'ny fanoloana azy isan'andro."23 Nisy fanadihadiana iray nilaza tsy nahy fa "ny NaHS dia mpanome H2S mahazatra ary matetika ampiasaina amin'ny fampiharana ara-pitsaboana mba hanoloana ny H2S mihitsy."18
Ny fifanakalozan-kevitra etsy ambony dia mampiseho fa very amin'ny vahaolana ny NaHS amin'ny alàlan'ny fiovaovan'ny rano, ny oksidasiona ary ny photolysis, ary noho izany dia misy soso-kevitra vitsivitsy atolotra mba hampihenana ny fahaverezan'ny H2S amin'ny vahaolana. Voalohany, ny etona amin'ny H2S dia miankina amin'ny fifandraisan'ny entona sy ny ranoka13 sy ny pH an'ny vahaolana11; noho izany, mba hampihenana ny fahaverezan'ny etona, dia azo atao kely araka izay azo atao ny vozon'ny tavoahangin-drano araka ny voalaza teo aloha15,19, ary ny pH an'ny rano dia azo amboarina amin'ny fetra ambony azo ekena (ohatra, 6.5–8.551) mba hampihenana ny fahaverezan'ny etona11. Faharoa, ny oksidasiona ho azy ny H2S dia mitranga noho ny vokatry ny oksizenina sy ny fisian'ny ion metaly tetezamita ao anaty rano fisotro13, ka ny deoxygenation ny rano fisotro miaraka amin'ny argon na azota44,45 sy ny fampiasana chelator metaly37,47 dia afaka mampihena ny oksidasionan'ny sulfida. Fahatelo, mba hisorohana ny photodecomposition ny H2S, dia azo fonosina amin'ny foil aluminium ny tavoahangin-drano; Ity fomba fanao ity dia mihatra amin'ny fitaovana mora tohina amin'ny hazavana toy ny streptozotocin55. Farany, ny sira solifida tsy organika (NaHS, Na2S, ary CaS) dia azo omena amin'ny alàlan'ny gavage fa tsy levona amin'ny rano fisotro araka ny voalaza teo aloha56,57,58; ny fanadihadiana dia naneho fa ny solifida sodium radioaktifa omena amin'ny alàlan'ny gavage amin'ny voalavo dia voatsindrona tsara ary zaraina amin'ny sela rehetra59. Hatramin'izao, ny ankamaroan'ny fanadihadiana dia nanome sira solifida tsy organika tao anaty peritoneal; na izany aza, ity fomba ity dia mahalana vao ampiasaina amin'ny toeram-pitsaboana60. Etsy ankilany, ny fomba am-bava no fomba fampiasana mahazatra sy tiana indrindra amin'ny olombelona61. Noho izany, manoro hevitra ny hanombana ny vokatry ny mpanome H2S amin'ny biby mpikiky amin'ny alàlan'ny gavage am-bava izahay.
Ny fetrany dia ny fandrefesanay ny solifara tao anaty rano sy serum tamin'ny fampiasana ny fomba MB. Ny fomba fandrefesana ny solifara dia ahitana ny titration iodine, spectrophotometry, fomba elektrokimia (potentiometry, amperometry, fomba coulometric ary fomba amperometric) ary chromatography (chromatography gazy sy chromatography ranoka avo lenta), izay anisan'ny fomba ampiasaina matetika indrindra ny fomba spectrophotometric MB62. Ny fetran'ny fomba MB amin'ny fandrefesana ny H2S amin'ny santionany biolojika dia ny fandrefesana ny singa rehetra misy solifara fa tsy ny H2S63 afaka satria atao ao anatin'ny toe-javatra asidra, izay miteraka fitrandrahana solifara avy amin'ny loharano biolojika64. Na izany aza, araka ny American Public Health Association, ny MB no fomba mahazatra amin'ny fandrefesana ny solifara ao anaty rano65. Noho izany, ity fetrany ity dia tsy misy fiantraikany amin'ny vokatra lehibe indrindra momba ny tsy fahamarinan'ny vahaolana misy NaHS. Ankoatra izany, tao amin'ny fianarantsika, ny famerenana ny fandrefesana ny solifara tao anaty rano sy ny santionany serum misy NaHS dia 91% sy 93% tsirairay avy. Ireo sanda ireo dia mifanaraka amin'ny elanelana voalaza teo aloha (77–92)66, izay manondro ny fahamarinan'ny fanadihadiana azo ekena42. Tsara homarihina fa nampiasa voalavo lahy sy vavy izahay mifanaraka amin'ny torolàlana avy amin'ny National Institutes of Health (NIH) mba hisorohana ny fiankinan-doha tafahoatra amin'ny fandalinana biby lahy ihany amin'ny fandalinana mialoha ny fitsaboana67 ary hampiditra voalavo lahy sy vavy isaky ny azo atao68. Nohamafisin'ny hafa io hevitra io69,70,71.
Ho famaranana, ny vokatry ny fanadihadiana dia manondro fa ny vahaolana NaHS namboarina avy amin'ny rano fisotro dia tsy azo ampiasaina hamokarana H2S noho ny tsy fahamarinan-toerana. Ity fomba fampiasana ity dia mety hampiharihary ny biby amin'ny haavon'ny NaHS tsy marin-toerana sy ambany noho ny nantenaina; noho izany, ny zavatra hita dia mety tsy azo ampiharina amin'ny olombelona.
Azo alaina avy amin'ny mpanoratra mifandraika amin'izany raha misy fangatahana ara-drariny ireo angon-drakitra nampiasaina sy/na nohadihadiana nandritra ny fanadihadiana ankehitriny.
Szabo, K. Fandaharam-potoanan'ny fikarohana momba ny hidrôzenina sulfide (H2S): avy amin'ny poizina avy amin'ny tontolo iainana ka hatramin'ny mpanelanelana biolojika. Biochemistry and Pharmacology 149, 5–19. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2017.09.010 (2018).
Abe, K. sy Kimura, H. Ny mety ho anjara asan'ny hidrôzenina sulfide amin'ny maha-neuromodulator endogenous azy. Journal of Neuroscience, 16, 1066–1071. https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.16-03-01066.1996 (1996).
Chirino, G., Szabo, C. ary Papapetropoulos, A. Ny anjara asan'ny hidrôzenina sulfide amin'ny lafiny fizika ao amin'ny sela, tavy ary taova amin'ny biby mampinono. Famerenana ao amin'ny Fiziolojia sy Biolojia Molekiola 103, 31–276. https://doi.org/10.1152/physrev.00028.2021 (2023).
Dillon, KM, Carrazzone, RJ, Matson, JB, ary Kashfi, K. Fampanantenana mivoatra momba ny rafitra fanaterana sela ho an'ny oksida azota sy solifidan'ny hidrôzenina: vanim-potoana vaovao amin'ny fitsaboana manokana. Biochemistry and Pharmacology 176, 113931. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2020.113931 (2020).
Sun, X., et al. Ny fampiasana maharitra mpamatsy hidrôzenina sulfide miadana dia afaka misoroka ny ratra amin'ny myocardial ischemia/reperfusion. Tatitra siantifika 7, 3541. https://doi.org/10.1038/s41598-017-03941-0 (2017).
Sitdikova, GF, Fuchs, R., Kainz, W., Weiger, TM ary Hermann, A. Ny phosphorylation amin'ny fantsona BK dia mandrindra ny fahatsapana ny hidrôzenina sulfide (H2S). Frontiers in Physiology 5, 431. https://doi.org/10.3389/fphys.2014.00431 (2014).
Sitdikova, GF, Weiger, TM sy Hermann, A. Mampitombo ny asan'ny fantsona potasioma (BK) miasa amin'ny kalsioma ao amin'ny sela fivontosan'ny pituitary voalavo ny hidrôzenina sulfide. Archit. Pfluegers. 459, 389–397. https://doi.org/10.1007/s00424-009-0737-0 (2010).
Jeddy, S., et al. Ny hidrôzenina sulfide dia mampitombo ny fiarovana ateraky ny nitrite amin'ny ratra amin'ny myocardial ischemia-reperfusion amin'ny voalavo voan'ny diabeta karazany 2. Nitric Oxide 124, 15–23. https://doi.org/10.1016/j.niox.2022.04.004 (2022).
Corvino, A., et al. Fironana amin'ny simia mpanome H2S sy ny fiantraikany amin'ny aretim-po. Antioxidants 10, 429. https://doi.org/10.3390/antiox10030429 (2021).
DeLeon, ER, Stoy, GF, ary Olson, KR (2012). Fahaverezan'ny hidrôzenina solifida amin'ny andrana biolojika. Biosimia analitika 421, 203–207. https://doi.org/10.1016/j.ab.2011.10.016 (2012).
Nagy, P., et al. Lafiny simika amin'ny fandrefesana ny hidrôzenina sulfida amin'ny santionany ara-batana. Biochimica et Biophysical Acta 1840, 876–891. https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2013.05.037 (2014).
Kline, LL.D. Famaritana spektrofotometrika ny hidrôzenina solifida ao anaty rano voajanahary. Limnol. Oceanogr. 14, 454–458. https://doi.org/10.4319/lo.1969.14.3.0454 (1969).
Olson, KR (2012). Fiofanana azo ampiharina amin'ny simia sy ny biôlôjian'ny hidrôzenina solifida. "Antioksidana." Redox Signaling. 17, 32–44. https://doi.org/10.1089/ars.2011.4401 (2012).